尊龙凯时人可溶性白细胞分化抗原86 (B7-2/sCD86) Elisa试剂盒专用于科研目的,不得用于医学诊断。该试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验 (ELISA) 进行检测。操作过程中,首先将标本、标准品及HRP标记的检测抗体依次加入预先包被的adropin (AD) 抗体微孔中,经过温育和多次洗涤后,使用底物TMB显色,最终生成的黄色反应产物的颜色深浅与样品中的adropin (AD) 浓度成正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度 (OD值),可计算出样品的浓度。
试剂盒组成
试剂盒包含以下组件:
- 微孔酶标板(96孔配置、48孔配置)
- 标准品:03mL*6管
- 样本稀释液:6mL(96孔),3mL(48孔)
- 检测抗体-HRP:10mL(96孔),5mL(48孔)
- 洗涤缓冲液:25mL(96孔),15mL(48孔)
- 底物A和底物B:各6mL(96孔),3mL(48孔)
- 终止液:6mL(96孔),3mL(48孔)
- 封板膜:2张
- 说明书:1份
- 自封袋:1个
样品收集、处理及保存方法
1. **血清**:使用不含热原和内毒素的试管,避免细胞刺激,收集后在3000转速下离心10分钟,迅速分离血清和红细胞。
2. **血浆**:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000转速离心30分钟后取上清。
3. **细胞上清液**:3000转速离心10分钟以去除颗粒和聚合物。
4. **组织匀浆**:将组织与生理盐水混合并捣碎,随后在3000转速下离心10分钟取上清。
5. **保存**:样本如未及时检测,应分装后冻存于-20℃,避免重复冻融,解冻时确保样品完全均匀化。
自备物品
- 酶标仪(450nm)
- 高精度加样器及枪头:05-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
- 37℃恒温箱
操作注意事项
1. 从冷藏环境中取出的试剂盒需在室温平衡15-30分钟后使用。若未使用完的板条须密封保存。
2. 洗涤液可能析出结晶,稀释时可加热以帮助溶解,不会影响结果。
3. 加样时需使用加样器,并定期校对其准确性,一次加样时间应控制在5分钟内。
4. 每次测定应同时制作标准曲线,建议使用复孔。如待测物质含量过高,应先稀释样品后进行测定,并在计算时乘以总稀释倍数。
5. 封板膜仅限一次性使用,以防交叉污染。
6. 操作时严格遵照说明书,结果以酶标仪读数为准。
7. 底物应避光保存。
8. 所有样品、洗涤液及废弃物需按传染处理。
9. 不同批次的试剂不得混用。